夏桑菊颗粒,夏桑菊颗粒的副作用

作者：黄晓文，谢艳婷，冯嘉欣，谢銮凤

【摘要】 目的 建立夏桑菊颗粒中蒙花苷的测定方法。方法 采用反相高效液相色谱法，色谱柱：DiamonsilTMC18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，迪马公司）；流动相为甲醇四氢呋喃水(43∶5∶52),检测波长334 nm，流速1.0 mL·min-1，柱温30 ℃。结果 蒙花苷在0.048～0.959 μg范围内线形关系良好，r=0.9999，平均加样回收率为100.7%，RSD为0.86%（n=6）。结论 所建立的方法准确，重现性好，灵敏度高,可用于该制剂的质量控制。

【关键词】 夏桑菊颗粒；蒙花苷；高效液相色谱法

　　夏桑菊颗粒收载于《卫生部药品标准》中药成方标准第15册,由夏枯草、野菊花、桑叶3味中药组成，具有清肝明目、疏风散热作用，用于治疗风热感冒、目赤头痛、头晕耳鸣、咽喉肿痛等症。野菊花是本制剂的主要成分之一，蒙花苷是野菊花的特征成分［1-2］，文献［3-5］ 报道以高效液相色谱法测定野菊花制剂中蒙花苷含量，主要采用加甲醇超声处理或回流提取的方法，本文根据蒙花苷不溶于水的性质［6］，以正丁醇萃取法提取蒙花苷，建立高效液相色谱法测定夏桑菊颗粒中蒙花苷含量的方法，结果准确、灵敏，阴性对照不干扰，为该制剂的质量控制提供依据。

　　1 仪器与试药

　　1．1 仪器
　　
　　日本岛津高效液相色谱仪（LC10Avp溶剂输送泵、SPD10Avp紫外可见检测器、SCL10Avp系统控制器、CTO10ASvp柱温箱）；岛津Lcsolution工作站；日本岛津AUW220D电子天平；HH2恒温水浴锅。

　　1．2 药品与试剂
　　
　　蒙花苷对照品：由中国药品生物制品检定所提供，批号110752200511，供含量测定用，质量分数95.9%。夏桑菊颗粒：广州星群（药业）股份有限公司。甲醇、四氢呋喃为色谱纯，水为双蒸水，正丁醇为分析纯。

　　2 方法与结果

　　2.1 溶液的制备

　　2．1．1 对照品溶液

　　精密称取经五氧化二磷干燥12 h的蒙花苷对照品5.00 mg，置100 mL容量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，得质量浓度为47.95 μg·mL-1的蒙花苷对照品贮备液。精密量取3.0 mL，置10 mL容量瓶，加甲醇稀释至刻度，摇匀，即得（质量浓度为14.39 μg·mL-1）。

　　2.1.2 供试品溶液

　　取装量差异项下的本品，研细，取5 g，精密称定，加水45 mL使溶解，用以水饱和的正丁醇提取 3次，每次正丁醇的用量分别为25、20、20 mL，合并正丁醇液；用以正丁醇饱和的水20 mL洗涤，洗涤后的水层用以水饱和的20 mL正丁醇提取,合并正丁醇液，水浴蒸干，残渣加甲醇适量使溶解，移至25 mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

　　2.1.3 阴性对照液

　　取处方中除野菊花外的其余成分制成不含野菊花的阴性对照品，按“2.1.2”项下的方法制备野菊花阴性对照溶液。
　2.2 色谱条件及系统适应性试验
　　
　　色谱柱：DiamonsilTM C18柱（250 mm×4.6 mm，5 μm，迪马公司）；流动相∶甲醇四氢呋喃水(体积比43∶5∶52)；流速：1.0 mL·min-1；检测波长334 nm；柱温为30 ℃。分别取蒙花苷对照品溶液、供试品溶液和野菊花阴性对照溶液各20 μL，按上述色谱条件，注入色谱仪。蒙花苷与样品中相邻色谱峰的分离度大于2.0,理论板数以蒙花苷计算应不低于2 500,阴性对照没有干扰。蒙花苷对照品、供试品溶液及阴性对照溶液的色谱图见图1、2、3。

　　2.3 方法学考察

　　2.3.1 线性关系考察

　　精密吸取0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mL的蒙花苷对照品贮备液，置10 mL的容量瓶中，用甲醇稀释至刻度，得质量浓度分别为2.40、4.80、9.59、19.18、28.77、38.36、47.95 μg· mL-1的系列对照品溶液。吸取上述系列对照品溶液各20 μL，分别进样测定，以峰面积（A）对溶液的质量浓度（ρ）进行回归，得回归方程A=43690ρ-5780，r=0.999 9，表明蒙花苷在0.048～0.959 μg之间与峰面积线性关系良好。

　　2.3.2 精密度试验

　　取蒙花苷对照溶液20 μL，注入色谱仪，连续测定6 6次，记录峰面积，结果蒙花苷峰面积的平均值为607 366，RSD为0.40%,表明仪器精密度良好。

　　2.3.3 重复性试验

　　取同一批号（批号DA11008）的样品6份，按“2.1.2”项下方法制备供试品溶液，进样测定，6次测定结果的RSD为1.44%，表明本方法重复性好。

　　2.3.4 稳定性试验

　　取同一供试品溶液（批号DA11008），分别在0、2、4、8、12、24 h进样20 μL，结果峰面积RSD为0.82%，表明供试品溶液在24 h内稳定。

　　2.3.5 加样回收试验

　　取已知含量（批号DA11008）的样品粉末约2.5 g，共6份，分别精密加入蒙花苷对照品贮备液（质量浓度为47.95 μg·mL-1）4.2 mL，按“2.1.2”项下方法制备溶液，按上述色谱条件下进样20 μL,测定，结果蒙花苷平均回收率为100.7%，RSD为0.86%，结果表明本方法准确可靠。结果见表1。表1 蒙花苷回收率试验结果（略）

　　2.4 样品测定

　　取夏桑菊颗粒样品3批，照“2.1.2”项下方法制备供试品溶液。取蒙花苷对照品溶液与供试品溶液各20 μL，注入色谱仪，测定，计算蒙花苷的含量。结果3批样品（批号DA11008、DA10788、DA10963）所测得的含量分别为0.929、0.897、0.706 mg.袋-1，RSD分别为0.5%、1.3%和1.1%（n=3）。

　　3 讨 论

　　3.1 蒙花苷提取方法的选择

分别考察了正丁醇萃取、甲醇回流、甲醇超声处理60 min等提取方法的提取效率，结果测得供试品（批号DA11008）中蒙花苷的含量分别为0.929、0.856、0.914 mg·袋-1，表明用正丁醇萃取时含量最高，且其他成分的干扰少, 蒙花苷与其他成分完全分离。 同时考察了正丁醇萃取的次数，分别将每次提取的正丁醇液蒸干后用甲醇定容至25 mL，进样测定，萃取1～4次制得的供试品溶液中蒙花苷的含量分别为353.4、52.9、8.6 μg和未检出；考察了以正丁醇提取以正丁醇饱和的水洗涤液的次数，结果提取1～2次的供试品溶液中蒙花苷的含量分别为3.5 μg和未检出， 故采用本方法制备供试品溶液。

　　3.2 关于检测波长的选择

采用SPDM10A二极管阵列检测器,对蒙花苷对照溶液和供试品溶液，在200～600 nm波长处进行扫描，结果在波长为334 nm处有最大吸收，其他成分没有干扰，故选择334 nm作为检测波长。见图4、图5。

　　3.3 流动相的选择

曾参考文献［2-6］分别采用不同比例的甲醇水、甲醇水磷酸、甲醇水冰醋酸、甲醇0.1%磷酸、乙腈0.5%磷酸作流动相，结果蒙花苷和本品中其他成分未能分离。经过对不同比例的甲醇四氢呋喃水进行试验，结果以甲醇四氢呋喃水（体积比43∶5∶52）为流动相时，蒙花苷可与其他组分完全分离，且峰形良好，该方法准确、灵敏，可用于本品的质量控制。

【参考文献】
　　［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典:一部［S］.北京:化学工业出版社,2005:219.

　　［2］谭晓杰,贾英,陈晓辉,等.RPHPLC法测定野菊花中蒙花苷含量［J］.沈阳药科大学学报,2004,21(6):434-435.

　　［3］张珊珊，彭艳梅，吴艳.HPLC法测定夏桑菊颗粒中蒙花苷含量研究［J］.中医药导报，2007,13(4):79-80.

　　［4］卢丹，吕高荣，邹节明.HPLC测定玉叶解毒颗粒中蒙花苷含量［J］.中国中药杂志，2005，30（3）：191-192.

　　［5］陈在敏.HPLC法测定感冒灵颗粒中蒙花苷的含量［J］.海峡药学，2005，17（4）：50-51.

　　［6］陈晓辉，潭晓杰，田中克佳，等.制备型高效液相色谱在中药野菊花化学成分分离中的应用［J］.药品评价,2004,1(5):359-361.

夏桑菊颗粒,夏桑菊颗粒的副作用

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