【摘要】 目的观察甘草酸对哮喘小鼠血清中一氧化氮(NO)、一氧化氮合酶(NOS)活性的影响，探讨甘草酸防治支气管哮喘的可能机制。方法建立小鼠卵蛋白哮喘模型, 测定正常、模型、激素和甘草酸各组血清中NO含量及NOS活性的变化。 结果模型组小鼠血清中NO含量及NOS活性的较正常组显著升高(P<0.01 )，甘草酸组血清中NO及NOS较模型组显著降低(P<0.05 )。结论甘草酸可降低哮喘小鼠血清中NO含量及NOS水平，对支气管哮喘有一定的防治作用。
【关键词】 甘草酸； 支气管哮喘； 一氧化氮； 一氧化氮合酶
Abstract：ObjectiveTo observe the effects of glycyrrhizin on nitric oxide and nitric oxide synthase in a mice model of bronchial asthma and to explore the mechanism of glycyrrhizin for treating asthma .MethodsThe mice model of bronchial asthma was established. The changes of the content of NO and the activity of NOS in every group were observed in serum. ResultsThe content of NO and the activity NOS in model group were increased as compared with normal group (P<0.01) and markedly decreased in glycyrrhizin group as compared with model group(P<0.05). ConclusionGlycyrrhizin can decrease the activity of NO and the content of NOS in serum and exert preventive and therapeutic effect for asthma.
Key words：Glycyrrhizin; Bronchial asthma; Nitric Oxide; Nitric oxide synthase
支气管哮喘是一种常见的支气管变态反应性疾病，其本质为一种气道的慢性炎症。论文学术科研网这种炎症使易感者对各种激发因子具有气道高反应性(AHR)，常引起广泛的气道痉挛。一氧化氮(NO)代表一种新型的生物信息递质，它作为一种新型信号分子调节着内皮细胞、平滑肌细胞和神经细胞等功能，参与组织炎症及损伤，在呼吸、循环和免疫等多系统疾病的病理生理过程中起着重要作用。许多研究表明NO在哮喘的发病和治疗中起重要作用［1］。甘草酸来源于中药甘草，是甘草的主要活性成分，已有报道证明甘草酸具有抗炎、抗过敏、抗病毒、抗变态反应、免疫调节等作用［2］。本研究通过观察甘草酸对哮喘小鼠血清中一氧化氮(NO)含量、一氧化氮合酶(NOS)活性的影响，探讨甘草酸防治支气管哮喘的可能机制。
1 器材与方法
1.1 试剂与仪器 卵蛋白（OVA，V级，美国Sigma）；甘草酸(新疆天山制药有限公司，批号：65020213，纯度>95%)；泼尼松(浙江仙据制药股份有限公司，批号：030629)；NO及NOS试剂盒（南京建成生物工程研究所）；JI-80-2B台式离心机（上海安亭科学仪器厂）；SC-A型超声雾化器（辽宁鞍山医疗电仪器厂）和722型分光光度计（上海分析仪器厂）。
1.2 实验动物及分组 昆明种小鼠40只(清洁级)， 雌性，体重(25±5 )g，广东医学院实验动物中心提供，动物合格证书编号：2006A028。按随机原则分4组，每组10只，分别为正常对照组、模型（哮喘）组、激素（泼尼松）组和甘草酸组。
1.3 小鼠过敏性哮喘动物模型的建立［3］小鼠于第1，7，14天给予腹腔注射10 μg卵蛋白+2 mg氢氧化铝凝胶，用生理盐水稀释到0.5 ml。第21天开始用1%卵蛋白雾化激发，通过人工调节雾化量使雾化吸入箱里卵蛋白颗粒浓度维持在10～20 mg/m3之间，1次/d，30 min/次，连续7 d。对照组小鼠用生理盐水腹腔注射和雾化。每次雾化前泼尼松组小鼠给予泼尼松1.5 mg/kg灌胃，甘草酸组小鼠给予甘草酸50 mg/kg灌胃， 另两组小鼠给予生理盐水0.2 ml/10 g g灌胃。
1.4 指标检测 最后一次雾化吸入后6h，小鼠眼球取血， 2 000 r/min离心10min分离血清，应用试剂盒测定血清中NO含量及NOS活性。
1.5 统计分析 实验结果以±s表示，采用ＳＰＳＳ10. 0统计分析软件计算相应的统计学参数。
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2 结果
各组小鼠血清中NO含量及NOS活性的变化。结果见表1。
3 讨论
支气管哮喘是多因子参与的气道慢性炎性反应性疾病, NO及NOS与哮喘有密切关系。NO具有调节众多病理生理过程的功能, 包括血管调节、舒张支气管、抑制血小板凝集、机体防御(如抗肿瘤)等作用，与许多疾病的发生关系密切［4］。NO是由NOS诱导产生的，生理状态下，原生型一氧化氮合酶(NOS)发挥作用产生适量的NO，发挥正常的生理功能，而在哮喘发作时，在IL-1，TNF-α等作用下可激活诱导型一氧化氮合酶(iNOS)，在iNOS介导下产生的大量NO作为细胞毒性和免疫信息分子，则具有杀伤和免疫调节作用，可增强毛细血管渗出，导致气道黏膜水肿，加重气道阻塞。
表1 各组小鼠血清NO含量及NOS活性（略）
与对照组比较，* P<0.01 ； 与哮喘组比较，▲P<0.05；n=10
甘草酸在结构上与皮质激素相似，在体内可延长或增强泼尼松的作用。甘草酸则对免疫调节介质的产生具有一定作用，并具有较强的补体抑制作用。甘草酸是一种有效的生物应答修饰剂，在增强机制免疫功能的同时抑制变态反应的发生［5］ 。 有文献报道黄芩苷与甘草甜素合用能明显改善豚鼠哮喘症状可能与两者合用后经不同途径使抗炎作用增强, 并通过抑制某些炎症因子释放减少iNOS激活，间接抑制NO合成有关［6］。实验结果表明甘草酸可降低哮喘组小鼠血清中NO含量及NOS活性，提示甘草酸抑制哮喘小鼠血清中NOS活性，降低NO含量，对支气管哮喘有一定的治疗作用。
【参考文献】
［1］ 张 焱, 回世洋, 张庆荣. 中医药治疗支气管哮喘对NO水平影响的研究［J］. 辽宁中医学院学报，2002,4(1):16.
［2］ Park HY, Park SH,Yoon HK,et al.Anti-allergic activity of 18beta-glycyrrhetinic acid-3-0-beta-D-gluccuronide［J］. Arch Pharm Res，2004,27(1): 57.
［3］ 商 艳,李 强,黄 怡,等. 不同剂量致敏原对小鼠过敏性哮喘模型的影响［J］. 第二军医大学学报，2002,23(1): 69.
［4］ 孙红霞,王冰梅,王雪松. 一氧化氮与支气管哮喘关系研究［J］. 北华大学学报(自然科学版),2003,4(5): 390.
［5］ 李 ?U,金亦涛,邱蓉丽，甘草酸类药物的研究进展及作用［J］. 抗感染药学,2004,1(3): 103.
［6］ 丁亚春, 刘 娅, 何小溪，等. 黄芩苷与甘草甜素合用对豚鼠实验性哮喘的影响［J］. 中国实验诊断学，2007,11(3): 366.
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